CD8-α 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400372-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- CD8-α Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- CD8-α 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 CD8-α 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 CD8A을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 CD8-α Antibody (D-9): sc-7970
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
CD8-α 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-400372-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD8-α 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-400372-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD8A는 CD8-α를 암호화하는데, CD8-α는 I형 막관통 당단백질로서 T 림프구와 일부 NK 세포 표면에서 CD8αα 동형이량체 또는 CD8αβ 이형이량체를 형성합니다. CD8-α는 TCR 복합체와 결합하고 LCK를 모집하여 초기 TCR 신호를 증폭함으로써 MHC class I 제한적 항원 인식을 위한 보조수용체(co-receptor)로 기능하며, 세포독성 효과기 분화와 면역 시냅스 형성을 뒷받침합니다. ZAP70 인산화, MAPK 신호전달, 칼슘 의존적 전사 프로그램 등 하위 경로에 미치는 영향을 통해 CD8A는 항원 특이적 반응과 면역 감시를 형성하는 데 기여합니다. CD8A 발현 변화와 CD8+ T 세포 침윤 양상은 감염, 자가면역, 종양 미세환경 연구에서 면역학적 상관지표로 널리 활용되며, 면역 회피 기전과 T 세포 기능장애의 메커니즘을 이해하는 데 정보를 제공합니다.
CD8-α 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 CD8A 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 CD8A 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 CD8A의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, CD8A 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.