Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CD30L Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423454
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD30L O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD30L, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD30L Anticorpo (RM153): sc-19984
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD30L Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423454 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Tnfsf8 codifica o CD30L (TNFSF8), um ligante de membrana do tipo II da superfamília do TNF que se liga ao CD30 (TNFRSF8) para modular a comunicação entre células imunes. A sinalização CD30L–CD30 influencia programas transcricionais dependentes de NF-κB e MAPK que moldam a coestimulação de células T, a produção de citocinas e a diferenciação induzida por ativação, e também pode afetar decisões de sobrevivência celular dependendo do contexto celular. Em modelos murinos, esse eixo é frequentemente estudado na organização de tecidos linfoides, nas respostas de centros germinativos e na regulação de redes de sinalização inflamatória relevantes para a desregulação imune e fenótipos linfoproliferativos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD30L (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tnfsf8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tnfsf8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tnfsf8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD30L.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tnfsf8 para a investigação da sinalização de CD30L, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tnfsf8 críticos para a função CD30L
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tnfsf8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD30L Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD30L Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tnfsf8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD30L Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD30L (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tnfsf8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tnfsf8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.