CD274/PD-L1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401140-LAC

CD274 kodiert für PD-L1 (CD274), einen Typ‑I‑Transmembranliganden des Immun‑Checkpoints, der an PD‑1 (PDCD1) bindet und die T‑Zell‑Aktivierung, die Zytokinproduktion sowie die periphere Toleranz moduliert. Die PD‑L1‑Expression wird durch entzündliche Signale wie IFN‑γ über die JAK/STAT‑Signalübertragung induziert und kann durch onkogene Signalwege einschließlich PI3K–AKT–mTOR und MAPK reguliert werden, wodurch Immun­signalgebung mit zellulären Stressantworten verknüpft wird. Durch die Bindung an PD‑1 trägt PD‑L1 zur Abschwächung antigenspezifischer Immunantworten bei und beeinflusst das Gleichgewicht zwischen Immunüberwachung und Immunflucht. Eine aberrante Regulation von PD‑L1 wird mit Immunfunktionsstörungen in Zusammenhang gebracht und ist ein breit untersuchtes Thema in der Krebsimmunologie sowie in Modellen chronischer Infektionen und Autoimmunität.

CD274/PD-L1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CD274-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD274/PD-L1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CD274-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD274/PD-L1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CD274-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.