Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CCK-BR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401867-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CCK-BRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CCK-BR (h) e o Plasmídeo Double Nickase CCK-BR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CCKBR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CCK-BR Anticorpo (E-3): sc-166690
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CCK-BR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401867-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CCK-BR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401867-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCKBR codifica o receptor humano de colecistocinina B (CCK-BR), um GPCR de classe A que se liga à gastrina e à colecistocinina para regular a fisiologia gastrointestinal e a sinalização neuroendócrina. A ligação do ligante ativa vias acopladas à proteína G, incluindo a mobilização de Ca2+ via PLCβ/IP3 e as cascatas MAPK/ERK, influenciando secreção, contratilidade do músculo liso e programas de proliferação celular. A sinalização de CCKBR interage com redes mais amplas de segundos mensageiros que modulam respostas transcricionais e a dinâmica de dessensibilização/internalização do receptor. A expressão ou a sinalização desregulada tem sido investigada no contexto de distúrbios gastrointestinais e neuroendócrinos e em modelos relacionados à oncologia, nos quais eixos de gastrina/CCK podem moldar fenótipos associados a tumores.
CCK-BR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CCKBR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CCKBR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CCKBR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CCKBR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.