caveolin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419480

概要

Cav2はカベオリン2（caveolin-2）をコードしており、カベオラ（caveolae）を構成する膜貫通性の構造成分の一つである。カベオリン2はカベオリン1と協調して、細胞膜の陥入構造の形成や、脂質ラフト微小ドメインの編成に関与する。さらに、受容体型チロシンキナーゼを介する経路、eNOS/NOシグナル伝達、細胞骨格リモデリングなどに関わるシグナルの区画化に加え、エンドサイトーシス／トランスサイトーシス、メカノトランスダクションにも影響を及ぼす。マウス組織では、Cav2の発現は主に内皮細胞、脂肪細胞、および一部の上皮系コンパートメントで顕著であり、膜輸送や血管恒常性の維持に寄与する。カベオラの生物学的機能の破綻は、心肺系および代謝系の表現型や、状況依存的な細胞遊走・増殖への影響と関連づけられており、Cav2は疾患関連モデルにおける膜組織化を研究するうえで有用な標的となる。

caveolin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCav2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cav2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cav2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、caveolin-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、caveolin-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cav2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• caveolin-2の機能に不可欠なCav2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cav2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• caveolin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびcaveolin-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cav2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  caveolin-2 HDRプラスミド（m）および caveolin-2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCav2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCav2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。