Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CAR Plasmide Double Nickase (h): sc-418548-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CAR Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CAR Double Nickase Plasmid (h) e il CAR Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CXADR. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CAR Antibody (E-1): sc-373791
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CAR Plasmide Double Nickase (h) | sc-418548-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CAR Plasmide Double Nickase (h2) | sc-418548-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CXADR codifica il recettore per Coxsackievirus e adenovirus (CAR), una proteina transmembrana della superfamiglia delle immunoglobuline che si localizza nelle giunzioni serrate degli epiteli e contribuisce all’adesione cellula‑cellula e all’organizzazione della barriera. CAR partecipa all’assemblaggio delle giunzioni e all’accoppiamento con il citoscheletro tramite interazioni con proteine scaffold quali MAGI e partner contenenti domini PDZ, influenzando la polarità epiteliale e l’architettura tissutale. Alterazioni dell’espressione di CXADR e della localizzazione di CAR sono state associate a cambiamenti dell’integrità epiteliale e di programmi di segnalazione rilevanti per la biologia del cancro, il rimodellamento miocardico e la suscettibilità all’ingresso virale, supportandone l’uso come nodo meccanicistico negli studi su interazioni ospite‑patogeno e biologia delle giunzioni.
CAR Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CXADR nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CXADR. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CXADR. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CXADR interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.