Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CAP1 Double Nickase Plasmid (h): sc-405060-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CAP1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CAP1 Double-Nickase-Plasmid (h) und CAP1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CAP1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CAP1: sc-376191
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CAP1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-405060-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CAP1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-405060-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Humanes CAP1 (cyclase-associated actin cytoskeleton regulatory protein 1) ist ein aktinbindendes Protein, das den Turnover von Aktinfilamenten und den Umbau des Zytoskeletts durch Interaktionen mit Cofilin und Profilin koordiniert und so Zellform, Motilität und endozytotischen Transport unterstützt. CAP1 trägt zur Regulation der Aktindynamik stromabwärts von Signalnetzwerken bei, die Adhäsion und Migration beeinflussen, und verknüpft den Zustand des Zytoskeletts mit übergeordneten Programmen wie Proliferation und Stressantworten. Eine veränderte CAP1-Expression oder -Aktivität wurde in mehreren Krebsmodellen mit Veränderungen der Zellinvasion, mit epithelial-mesenchymalen-Transition-(EMT)-assoziierten Phänotypen und mit Tumorprogression in Verbindung gebracht. Diese Funktionen machen CAP1 zu einem nützlichen Knotenpunkt, um aktinabhängige Prozesse, Membrantransport und das Zusammenspiel zwischen Signalgebung und Zytoskelett in menschlichen Zellen zu untersuchen.
CAP1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CAP1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CAP1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CAP1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CAP1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.