Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CaMKII gamma Double Nickase Plasmid (h): sc-400681-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CaMKII gamma Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CaMKII gamma Double-Nickase-Plasmid (h) und CaMKII gamma Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CAMK2G abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CaMKII gamma: sc-517278
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CaMKII gamma Double Nickase Plasmid (h) | sc-400681-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CaMKII gamma Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400681-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane CAMK2G-Gen kodiert CaMKII-Gamma, eine durch Ca2+/Calmodulin aktivierte Serin/Threonin-Kinase, die Calciumtransienten in Phosphorylierungsprogramme übersetzt, welche synaptische Plastizität, die Kopplung von Erregung und Transkription sowie den Umbau des Zytoskeletts steuern. CaMKII-Gamma ist an der CaMK-Signalübertragung sowie nachgeschalteten MAPK/ERK- und CREB-gekoppelten Transkriptionswegen beteiligt und beeinflusst dadurch Zellmotilität, Vesikeltransport und aktivitätsabhängige Genexpression. Veränderte CAMK2G-Aktivität oder -Expression wird mit einer gestörten Calcium-Signalgebung in Verbindung gebracht, die bei neurologischen Phänotypen und erregbarkeitsbezogenen Prozessen eine Rolle spielt; zudem wird CAMK2G auch im Kontext aberranter Signalgebung in proliferativen und Stressantwort-Signalwegen untersucht.
CaMKII gamma Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CAMK2G-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CAMK2G abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CAMK2G-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CAMK2G-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.