calsequestrin 1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403375

개요

CASQ1은 골격근에서 근형질세망(sarcoplasmic reticulum, SR) 내강에 존재하는 고용량 Ca²⁺ 결합 단백질인 칼세퀘스트린 1(calsequestrin 1)을 암호화하며, Ca²⁺를 완충하여 흥분–수축 연결(excitation–contraction coupling)의 특성을 형성하는 데 기여합니다. CASQ1은 라이아노딘 수용체 복합체 및 접합부 SR(junctional SR) 구성요소와 상호작용함으로써 수축성, 피로 저항성, 근섬유 항상성을 좌우하는 Ca²⁺ 방출 및 재흡수 역학을 지지합니다. CASQ1 의존적 Ca²⁺ 처리의 교란은 세포내 Ca²⁺ 신호 변화, 산화 스트레스 반응, SR 구조의 재형성과 연관되어 있습니다. 유전학적 및 기능적 연구들은 CASQ1이 악성 고열증 유사 표현형과, Ca²⁺ 저장 장애 및 Ca²⁺ 방출 조절 이상을 특징으로 하는 기타 골격근 질환에 대한 감수성과 관련됨을 시사합니다.

calsequestrin 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CASQ1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CASQ1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CASQ1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 calsequestrin 1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 calsequestrin 1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CASQ1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• calsequestrin 1 기능에 중요한 CASQ1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CASQ1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• calsequestrin 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 calsequestrin 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CASQ1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  calsequestrin 1 HDR 플라스미드 (h) 및 calsequestrin 1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CASQ1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CASQ1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.