Plásmido Doble Nickase (h) cadherin-16: sc-401598-NIC

CDH16 codifica la cadherina-16, una molécula de adhesión célula–célula dependiente de calcio, enriquecida en el epitelio tubular renal, que ayuda a mantener la polaridad epitelial y la arquitectura tisular. Mediante adhesión homofílica y su acoplamiento a las cateninas, la cadherina-16 influye en el ensamblaje de las uniones adherentes, la organización del citoesqueleto y procesos de señalización vinculados a la diferenciación epitelial y la función de barrera. La expresión alterada de CDH16 se asocia con una integridad tubular comprometida y se ha descrito en la fisiopatología renal y en la biología de tumores renales, lo que respalda su utilidad como marcador y como nodo funcional en la regulación del estado epitelial. El estudio de la cadherina-16 aporta información sobre la remodelación de uniones, la plasticidad epitelial y los cambios dependientes del contexto en los programas de adhesión celular.

cadherin-16 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CDH16 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CDH16. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CDH16. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CDH16 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.