Cacna2d2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425312
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cacna2d2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Cacna2d2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cacna2d2 Anticorpo (G-5): sc-365911
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cacna2d2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-425312 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cacna2d2 codifica a subunidade auxiliar α2δ-2 dos canais de cálcio dependentes de voltagem, um regulador essencial do tráfego dos canais, da expressão na membrana e das propriedades biofísicas que moldam o influxo de cálcio durante a excitabilidade neuronal e a transmissão sináptica. Ao modular a função dos canais CaV, a CACNA2D2 influencia a sinalização dependente de atividade, a liberação de neurotransmissores e programas de expressão gênica dependentes de cálcio que afetam o desenvolvimento e a plasticidade de circuitos. Alterações genéticas e funcionais nas subunidades α2δ têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e neurológicos, com Cacna2d2 particularmente ligado à função cerebelar e a vias de coordenação motora. Essas características tornam o Cacna2d2 um alvo útil para dissecar mecanismos acessórios de canais de cálcio em neurobiologia e em modelos de doença focados em eletrofisiologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Cacna2d2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cacna2d2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cacna2d2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cacna2d2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Cacna2d2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cacna2d2 para a investigação da sinalização de Cacna2d2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cacna2d2 críticos para a função Cacna2d2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cacna2d2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Cacna2d2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Cacna2d2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cacna2d2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Cacna2d2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Cacna2d2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cacna2d2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cacna2d2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.