C17orf96 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-408662

概要

EPOP（C17orf96）は、ポリコーム抑制複合体2（PRC2）の構成要素として機能するクロマチン関連因子をコードしており、標的遺伝子座におけるH3K27メチル化の制御を通じて、エピジェネティックな遺伝子サイレンシングを支えます。PRC2を補助タンパク質と結び付けることで、C17orf96は細胞の同一性、分化、発生過程の遺伝子発現を形作る転写抑制プログラムの協調に寄与します。PRC2関連抑制因子の異常やH3K27me3の分布（ランドスケープ）の破綻は、がん原性の転写状態や、クロマチン制御が変化するその他の疾患にしばしば関与します。そのためEPOPは、クロマチンリモデリング、系譜（ラインエージ）規定、ならびに腫瘍抑制遺伝子や分化関連遺伝子の異常な抑制といった観点から研究されています。

C17orf96 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるEPOP遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、EPOP内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、EPOPのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、C17orf96タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、C17orf96シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、EPOP欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• C17orf96の機能に不可欠なEPOPエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、EPOPゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• C17orf96 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびC17orf96 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、EPOP遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  C17orf96 HDRプラスミド（h）および C17orf96 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはEPOPホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のEPOP標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。