C-Nap1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421134

개요

Cep250는 중심체의 코일드코일 단백질인 C-Nap1을 암호화하며, C-Nap1은 중심립의 근위 말단에 집중적으로 존재하면서 중심체 결합(cohesion)과 중심체 주위 물질(pericentriolar material, PCM)의 조직화에 기여합니다. C-Nap1은 세포 주기에 의해 조절되는 중심체 역학에서 기능하며, 키나아제 신호전달 및 스캐폴드 단백질과 협력해 양극성 방추체 형성, 정확한 염색체 분리, 미세소관 구조의 유지에 필요한 역할을 합니다. 중심체 결합과 방추체 무결성의 붕괴는 모델 시스템에서 유전체 불안정성, 세포분열 이상, 그리고 발달성 또는 신경퇴행성 표현형과 밀접하게 연관되어 있습니다. 따라서 마우스 세포 및 조직 연구에서 Cep250는 증식, 분화, 조직 항상성에 영향을 미치는 중심체 관련 경로를 규명하기 위한 유용한 핵심 요소로 활용됩니다.

C-Nap1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Cep250 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Cep250 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Cep250의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 C-Nap1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 C-Nap1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Cep250 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• C-Nap1 기능에 중요한 Cep250 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Cep250 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• C-Nap1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 C-Nap1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Cep250 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  C-Nap1 HDR 플라스미드 (m) 및 C-Nap1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Cep250 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Cep250 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.