C/EBP α CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419621

概要

Cebpaは転写因子C/EBPαをコードしている。C/EBPαは塩基性ロイシンジッパー型の制御因子で、複数の組織において系譜決定と終末分化を協調的に制御し、とりわけ骨髄系細胞および脂肪細胞の発生に重要な役割を果たす。造血細胞では、C/EBPαがシグナル入力を統合し、増殖と分化を司る転写ネットワークを調節することで、細胞周期からの離脱と成熟プログラムを制御する。さらに、代謝制御、炎症性遺伝子発現、クロマチンリモデリングに関わる経路とも連携し、細胞のアイデンティティやストレス応答に影響を及ぼす。C/EBPα活性の破綻は、分化不全、免疫恒常性の変化、血液疾患の機序と関連して、マウスモデルでしばしば研究対象となっている。

C/EBP α CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCebpa遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cebpa内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cebpaのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、C/EBP αタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、C/EBP αシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cebpa欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• C/EBP αの機能に不可欠なCebpaエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cebpaゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• C/EBP α CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびC/EBP α CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cebpa遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  C/EBP α HDRプラスミド（m）および C/EBP α HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCebpaホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCebpa標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。