BTG3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407253

概要

BTG3（B-cell translocation gene 3）は、細胞周期制御と細胞分化の協調に関与するBTG/TOBファミリーの増殖抑制タンパク質をコードします。BTG3は転写共役調節因子として機能し、G1/S移行、DNA損傷応答、アポトーシスシグナル伝達を制御する経路と相互作用することで、その活性をゲノム安定性の維持と結び付けています。BTG3の発現変動は複数の腫瘍で報告されており、増殖制御の破綻、ストレス応答シグナルの異常、分化状態の変化と関連することが多いため、増殖制御の機構解析における有用な解析ノードとなります。

BTG3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBTG3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BTG3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BTG3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BTG3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BTG3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BTG3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BTG3の機能に不可欠なBTG3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BTG3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BTG3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBTG3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BTG3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BTG3 HDRプラスミド（h）および BTG3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBTG3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBTG3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。