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BRD4慢病毒激活颗粒(h) | sc-400519-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
BRD4慢病毒激活颗粒(h2) | sc-400519-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
BRD4(含溴结构域蛋白4)是一种染色质“读取器”,可通过其溴结构域结合乙酰化组蛋白,并通过招募 P-TEFb 以及调控 RNA 聚合酶 II 的暂停释放,帮助协调转录起始与延伸。它是增强子和超级增强子处表观遗传调控的核心组成部分,将各类信号输入整合进基因表达程序,从而调控细胞周期进程、炎症反应以及谱系特异性分化。BRD4 依赖的转录网络与 NF-κB 信号、MYC 驱动的程序等通路相互交叉,使 BRD4 成为研究“转录成瘾”和染色质状态失调的关键枢纽。BRD4 活性改变及增强子重塑与增殖和炎症表型相关,因此 BRD4 常被用于癌症生物学、免疫学及发育相关基因调控等领域的机制研究。
BRD4 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 BRD4 表达。
BRD4 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在BRD4转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性BRD4表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 BRD4 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。