Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
BORIS Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-437064-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BORISO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BORIS (m) e o Plasmídeo Double Nickase BORIS (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ctcfl. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BORIS Anticorpo (F-1): sc-377085
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BORIS Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-437064-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BORIS Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-437064-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Ctcfl** de camundongo codifica o **BORIS** (Brother of the Regulator of Imprinted Sites), uma proteína de ligação ao DNA do tipo dedo de zinco **C2H2**, relacionada ao **CTCF**, que ajuda a moldar a arquitetura da cromatina e programas transcricionais específicos de sequência. O BORIS participa da regulação epigenética por meio de interações com complexos de modificação de histonas e de remodelamento de cromatina, influenciando a atividade de promotores e enhancers, os estados de metilação do DNA e o isolamento transcricional. A expressão alterada de BORIS tem sido associada a padrões desregulados de expressão gênica observados na biologia das células germinativas e em múltiplos contextos ligados ao câncer, tornando-o relevante para estudos de organização da cromatina, identidade celular e estabilidade do genoma. Assim, seu locus é de interesse para investigar como mudanças na regulação tridimensional do genoma e no controle epigenético contribuem para redes transcricionais aberrantes.
BORIS O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ctcfl em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ctcfl. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ctcfl. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ctcfl interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.