BNP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421946

概要

Nppb は、心筋の伸展や神経体液性因子によって発現が亢進する、分泌性の心臓ホルモンである B 型ナトリウム利尿ペプチド（BNP）をコードします。proBNP からプロセシングされた後、BNP はナトリウム利尿ペプチド受容体を介してシグナルを伝達し、グアニル酸シクラーゼ活性を促進して cGMP を増加させ、血管緊張、利尿（ナトリウム利尿）、および心臓リモデリングに関わるプログラムを調節します。マウスでは、Nppb の発現は血行動態ストレスや心筋細胞肥大の分子指標として広く用いられており、線維化、細胞外マトリックスのターンオーバー、炎症性シグナルを制御する経路と関連づけられています。BNP／NP シグナルの調節異常は、心臓の圧負荷、心不全に伴うリモデリング表現型、ならびに心腎恒常性に関する研究において重要です。

BNP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNppb遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Nppb内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Nppbのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BNPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BNPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Nppb欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BNPの機能に不可欠なNppbエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Nppbゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BNP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびBNP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Nppb遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BNP HDRプラスミド（m）および BNP HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNppbホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNppb標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。