beta Actin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-418965

개요

Actb는 마우스 베타 액틴(beta actin)을 암호화하며, 베타 액틴은 미세섬유로 중합되어 세포의 형태, 극성, 그리고 기계적 안정성을 지지하는 고도로 보존된 세포골격 단백질입니다. 베타 액틴의 동역학은 Rho 계열 GTPase와 액틴 결합 단백질이 관여하는 경로에서 액틴의 핵형성, 가지치기, 회전율(턴오버)이 정교하게 조절되는 것을 통해 세포질분열, 소포 수송, 세포 이동 등 핵심 과정들을 구동합니다. 구조적 역할을 넘어, 액틴 리모델링은 기계적 신호전달(mechanotransduction)과 핵 내 액틴 풀을 조절함으로써 전사 프로그램과 신호전달에도 영향을 미칩니다. 액틴 조직화의 이상은 발달 결함, 상처 치유 장애, 면역세포 운동성 변화, 종양세포 침윤에 대한 실험 모델에서 광범위하게 연관되어 있으며, 이로 인해 Actb는 세포생물학 및 질병 기전 연구에서 중요한 기준(reference) 유전자 좌위로 활용됩니다.

beta Actin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Actb 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Actb 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Actb의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 beta Actin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 beta Actin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Actb 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• beta Actin 기능에 중요한 Actb 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Actb 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• beta Actin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 beta Actin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Actb 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  beta Actin HDR 플라스미드 (m) 및 beta Actin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Actb 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Actb 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.