BCLAF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-428381

概要

Bclaf1はBCLAF1をコードしており、転写制御、pre-mRNAスプライシング、ならびにクロマチンに関連した遺伝子発現制御に関与するとされる、核内のDNA/RNA結合因子です。BCLAF1は、BCL2ファミリーのシグナル伝達やストレス応答性の転写ネットワークとの相互作用を介して、DNA損傷応答やアポトーシス関連プログラムと関連づけられています。マウス細胞では、BCLAF1はゲノム安定性の維持や、発生および免疫に関連する遺伝子発現を形作る細胞周期・生存経路の調節に寄与します。BCLAF1活性の制御異常は、増殖能の変化やRNAプロセシングの異常表現型と関連し、がん生物学や神経免疫シグナルの文脈で重要となる可能性があります。

BCLAF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるBclaf1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Bclaf1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Bclaf1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BCLAF1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BCLAF1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Bclaf1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BCLAF1の機能に不可欠なBclaf1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Bclaf1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BCLAF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびBCLAF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Bclaf1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BCLAF1 HDRプラスミド（m）および BCLAF1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBclaf1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBclaf1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。