Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BAF170 Double Nickase Plasmid (h): sc-402023-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das BAF170 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- BAF170 Double-Nickase-Plasmid (h) und BAF170 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf SMARCC2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: BAF170: sc-17838
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
BAF170 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402023-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BAF170 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402023-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMARCC2 kodiert BAF170, eine zentrale strukturelle Unterheit des ATP‑abhängigen SWI/SNF‑(BAF‑)Chromatin‑Remodeling‑Komplexes, der die Positionierung von Nukleosomen und die höhergeordnete Chromatinorganisation reguliert. BAF170 unterstützt linien‑/zelltypspezifische Transkriptionsprogramme, indem es die Zugänglichkeit von Enhancern und Promotoren koordiniert, und beeinflusst dadurch Prozesse wie neuronale Entwicklung, Zellzykluskontrolle und Differenzierung. Über Interaktionen mit Faktoren der DNA‑Schadensantwort und der Transkriptionsregulation trägt SMARCC2 zur Aufrechterhaltung der Genomstabilität und des epigenetischen Zustands bei. Eine veränderte Zusammensetzung des SWI/SNF‑Komplexes oder eine Störung des mit SMARCC2 verbundenen Chromatin‑Remodelings wurde mit fehlgesteuerten Genexpressionsprogrammen in unterschiedlichen Krankheitskontexten in Verbindung gebracht, darunter Krebs und neuroentwicklungsbedingte Störungen.
BAF170 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des SMARCC2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von SMARCC2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die SMARCC2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit SMARCC2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.