BACE2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403147

개요

BACE2(β-사이트 APP 절단 효소 2)는 펩신 계열에 속하는 I형 막관통 아스파르틸 프로테아제로, 분비 및 엔도사이토시스(내재화) 소기관에 국재하며 막단백질의 조절된 단백질분해에 기여합니다. BACE2는 아밀로이드 전구체 단백질(APP) 처리와 연관된 경로 및 골지–엔도솜–리소좀 시스템 전반의 단백질 항상성(proteostasis)에 관여하여, 기질 단백질의 수송과 분해(턴오버)에 영향을 줍니다. BACE2 활성은 신경생물학 및 대사 조절 맥락에서 연구되어 왔으며, 췌장 소도 기능과 염증성 신호전달 네트워크도 그 범위에 포함됩니다. BACE2 발현 또는 프로테아제 활성이 비정상적으로 조절될 경우 신경퇴행 및 암 관련 세포 행동에서 질환 관련 표현형과 연관되는 것으로 보고되어, 기능유전체학에서 기전적 표적으로 활용될 수 있음을 뒷받침합니다.

BACE2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 BACE2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 BACE2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 BACE2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 BACE2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 BACE2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 BACE2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• BACE2 기능에 중요한 BACE2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 BACE2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• BACE2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 BACE2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 BACE2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  BACE2 HDR 플라스미드 (h) 및 BACE2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 BACE2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 BACE2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.