Plasmide Double Nickase (h) BABAM1: sc-409906-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BABAM1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BABAM1 Double Nickase (h) et le plasmide BABAM1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BABAM1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BABAM1 Antibody (H-10): sc-398570
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BABAM1 | sc-409906-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BABAM1 | sc-409906-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BABAM1 (également appelé MERIT40) code un composant central du complexe BRCA1-A, qui recrute BRCA1 sur les cassures double brin de l’ADN et contribue à coordonner la signalisation dépendante de l’ubiquitine aux sites de stress génotoxique. En se liant à des partenaires tels que RAP80, ABRAXAS1 et BRE/BRCC45, BABAM1 favorise l’assemblage d’un module de désubiquitination qui module les chaînes d’ubiquitine liées en K63 et régule le contrôle des points de contrôle des dommages à l’ADN ainsi que le choix de la voie de recombinaison homologue. Cette activité relie BABAM1 au maintien de la stabilité du génome, aux réponses au stress de réplication et à la progression du cycle cellulaire. La dérégulation des composants du complexe BRCA1-A, dont BABAM1, a été associée à une altération de la capacité de réparation de l’ADN et à des phénotypes d’instabilité génomique pertinents en oncologie et dans d’autres troubles de la réponse aux dommages de l’ADN.
BABAM1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BABAM1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BABAM1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BABAM1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BABAM1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.