B230216G23Rik CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-435631

개요

Spx(B230216G23Rik)는 아직 충분히 규명되지 않은 마우스 유전자로, 전사 조절과 세포 항상성 프로그램에 관여하여 스트레스 적응과 대사 상태에 영향을 줄 가능성을 시사하는 근거들이 보고되어 있습니다. 다른 주석 정보가 빈약한 유전자 좌위와 마찬가지로, Spx의 발현과 추정되는 단백질 상호작용은 핵–세포질 신호전달, RNA 가공, 단백질 항상성(proteostasis) 네트워크의 맥락에서 자주 연구되며, 이러한 네트워크는 세포주기 양상과 분화 잠재력에 영향을 줄 수 있습니다. 이러한 조절 노드의 변이는 모델 생물에서 신경발달, 면역 조절, 그리고 복합 질환 형질에 대한 감수성과 관련된 표현형과의 연관성을 탐색하는 데 흔히 활용됩니다. 따라서 Spx의 기능을 정밀하게 규명하는 작업은 유전자 네트워크를 매핑하고, 경로 의존성을 식별하며, 마우스 유래 시스템에서 유전자형-표현형 관계를 해석하는 데 유용합니다.

B230216G23Rik CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Spx 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Spx 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Spx의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 B230216G23Rik 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 B230216G23Rik 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Spx 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• B230216G23Rik 기능에 중요한 Spx 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Spx 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• B230216G23Rik CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 B230216G23Rik CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Spx 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  B230216G23Rik HDR 플라스미드 (m) 및 B230216G23Rik HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Spx 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Spx 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.