ATP5F1 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-405710-NIC

ATP5F1은 미토콘드리아 F1F0 ATP 합성효소(복합체 V)의 촉매 핵심을 암호화하는 유전자로, 미토콘드리아 내막을 사이에 두고 산화적 인산화를 ATP 생성과 결합시키는 핵심 효소입니다. ATP5F1은 양성자 구동력(proton motive force)을 세포 내 ATP로 전환함으로써 이온 항상성, 생합성, 스트레스 적응 등 에너지 의존적 과정들을 뒷받침하며, 전자전달계 활성 및 미토콘드리아 막전위 조절과도 통합적으로 작동합니다. ATP 합성효소 기능의 교란은 미토콘드리아 기능장애, 활성산소종(ROS) 처리의 변화, 그리고 세포 생존과 증식에 영향을 줄 수 있는 대사 재프로그래밍과 연관되어 있습니다. 생체에너지 대사의 중심 노드로서 ATP5F1은 신경근육 및 신경퇴행성 표현형, 그리고 암세포 대사에서의 미토콘드리아 기여와 관련된 맥락에서 자주 연구됩니다.

ATP5F1 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 ATP5F1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 ATP5F1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 ATP5F1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, ATP5F1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.