Date published: 2026-7-22

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ATIII 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-419222-NIC

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데이터 시트
  • Target species: mouse
  • 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
  • ATIII Double Nickase Plasmid (m) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
  • 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
  • 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
  • ATIII 더블 니케이스 플라스미드 (m) 및 ATIII 더블 니케이스 플라스미드 (m2)는 Serpinc1을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
  • Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 ATIII Antibody (H-7): sc-271987
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    주문정보

    제품명카탈로그 번호 단위가격수량관심품목

    ATIII 더블 틈내기효소 플라스미드 (m)

    sc-419222-NIC
    20 µg
    $410.00

    ATIII 더블 틈내기효소 플라스미드 (m2)

    sc-419222-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    Serpinc1은 항트롬빈 III(ATIII)를 암호화하는 유전자로, ATIII는 분비형 세린 프로테아제 억제제이며 트롬빈과 응고인자 Xa를 불활성화함으로써 혈액응고를 억제합니다. 이 활성은 헤파란 황산과 헤파린에 의해 크게 강화됩니다. 마우스에서 ATIII는 혈관 항상성에 기여하며, 프로테아제에 의해 구동되는 경로를 조절함으로써 응고를 염증성 신호전달 및 내피 기능과 연결합니다. ATIII 활성의 교란은 과응고성 표현형 및 혈전 형성 취약성과 연관되어 있어, Serpinc1은 지혈과 혈전-염증성 상호작용(crosstalk)을 연구하는 데 핵심적인 유전자입니다. 또한 ATIII는 주로 간세포에서 생성되어 혈장 당단백질로 순환하므로, Serpinc1은 간의 합성 및 분비 경로와도 관련이 있습니다.

    ATIII 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Serpinc1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Serpinc1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Serpinc1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

    편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Serpinc1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

    연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.