Atg2B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-429358

개요

Atg2b는 자가포식 관련 단백질인 Atg2B를 암호화하며, Atg2B는 오토파고좀(autophagosome)의 생성과 성숙에 필수적인 보존된 인자입니다. Atg2B는 막 접촉 부위에서 지질 처리에 관여하여 파고포어(phagophore) 확장과 효율적인 자가포식 플럭스(autophagic flux)를 지원하며, 이러한 과정은 영양 감지와 소기관 품질 관리를 통합합니다. Atg2B가 관여하는 자가포식 경로에 이상이 생기면 단백질 항상성(proteostasis), 미토콘드리아 항상성, 선천면역 신호전달이 교란될 수 있으며, 그 결과 이 유전자는 실험 모델에서 신경퇴행, 암 생물학, 염증성 표현형과 관련된 기전과 연결됩니다. 따라서 마우스 시스템에서 Atg2b는 세포 스트레스 적응과 손상된 거대분자의 제거/턴오버에서의 역할로 널리 연구됩니다.

Atg2B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Atg2b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Atg2b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Atg2b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Atg2B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Atg2B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Atg2b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Atg2B 기능에 중요한 Atg2b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Atg2b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Atg2B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Atg2B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Atg2b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Atg2B HDR 플라스미드 (m) 및 Atg2B HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Atg2b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Atg2b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.