Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ataxin-2 (m): sc-422807
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Ataxin-2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Ataxin-2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ataxin-2 Antibody (A-6): sc-515602
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ataxin-2 (m) | sc-422807 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Atxn2 code la protéine de liaison à l’ARN Ataxin-2, un régulateur conservé de l’expression génique post-transcriptionnelle qui s’associe aux polyribosomes et aux granules ribonucléoprotéiques afin d’influencer la stabilité et la traduction des ARNm. Dans les cellules de souris, Ataxin-2 participe à la dynamique des granules de stress et des P-bodies, reliant la signalisation nutritionnelle et les réponses au stress cellulaire au métabolisme de l’ARN. Elle interagit avec des voies contrôlant la protéostasie et l’homéostasie neuronale, et une altération du dosage d’ATXN2 a été associée à des processus liés à la neurodégénérescence. Ces caractéristiques font d’Atxn2 une cible utile pour disséquer les réseaux de régulation de l’ARN, les programmes d’adaptation au stress et des phénotypes pertinents pour les neurones dans des modèles expérimentaux.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Ataxin-2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Atxn2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Atxn2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Atxn2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Ataxin-2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Atxn2 pour l'étude de la signalisation de Ataxin-2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Atxn2 essentiels à la fonction de Ataxin-2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Atxn2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Ataxin-2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Ataxin-2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Atxn2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Ataxin-2 plasmide HDR (m) et le Ataxin-2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Atxn2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Atxn2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.