ATAD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-413720-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ATAD1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ATAD1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ATAD1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATAD1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ATAD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-413720-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATAD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-413720-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATAD1 (proteína 1 contendo domínio AAA da família ATPase) é uma ATPase AAA+ ancorada à membrana que se localiza principalmente na membrana externa mitocondrial, onde dá suporte ao controle de qualidade proteica ao extrair proteínas de ancoragem caudal (tail-anchored) mal localizadas ou bloqueadas e coordenar a sua degradação. Por meio de remodelamento dependente de ATP e de interações com as vias de ubiquitina–proteassoma, a ATAD1 ajuda a manter a proteostase mitocondrial, a integridade da organela e a homeostase celular sob estresse proteotóxico ou metabólico. A perturbação da vigilância dependente de ATAD1 pode desregular a dinâmica mitocondrial e a função bioenergética, conectando esse fator a redes mais amplas de resposta ao estresse que influenciam a sobrevivência e a diferenciação celular. Alterações na atividade de ATAD1 e mudanças no número de cópias têm sido investigadas no contexto da biologia tumoral e de fenótipos neurodegenerativos, nos quais a disfunção mitocondrial é uma característica central.
ATAD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATAD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATAD1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATAD1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATAD1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.