ASS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401923-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ASS1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ASS1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ASS1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ASS1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ASS1 Anticorpo (E-12): sc-365475
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ASS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401923-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ASS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401923-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A ASS1 humana (argininossuccinato sintetase 1) catalisa a condensação dependente de ATP da citrulina com o aspartato para formar argininossuccinato, uma etapa central do ciclo da ureia que permite a desintoxicação da amônia e sustenta a homeostase sistêmica do nitrogênio. Para além da ureogênese hepática, a atividade da ASS1 influencia a disponibilidade intracelular de arginina, conectando o fluxo do ciclo da ureia à biossíntese de óxido nítrico e a aspectos mais amplos do metabolismo de aminoácidos. A expressão ou a função alteradas da ASS1 estão associadas a distúrbios do ciclo da ureia, como a citrulinemia tipo I, e também foram observadas em contextos tumorais nos quais a auxotrofia por arginina e a reprogramação metabólica estão sendo investigadas. Essas características tornam a ASS1 um ponto útil para estudar o processamento do nitrogênio, o acoplamento metabólico mitocôndria–citosol e respostas ao estresse por limitação de aminoácidos.
ASS1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ASS1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ASS1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ASS1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ASS1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.