Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ASC-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425141
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Asc-1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Asc-1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ASC-1 Anticuerpo (F-8): sc-365202
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ASC-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-425141 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Trip4 codifica ASC-1, un coactivador transcripcional que actúa dentro del complejo Activating Signal Cointegrator-1 (ASC-1) para acoplar factores de transcripción específicos de secuencia con la maquinaria de la ARN polimerasa II. ASC-1 contribuye a la regulación de programas de expresión génica vinculados a la señalización de receptores nucleares y al control transcripcional más amplio, incluidos procesos que influyen en la diferenciación, el metabolismo y las respuestas celulares al estrés. En sistemas murinos, la modulación transcripcional dependiente de Trip4 se utiliza para analizar cómo los coactivadores integran señales para moldear las salidas transcripcionales asociadas a la cromatina. Las alteraciones en la función del complejo ASC-1 se han asociado con la desregulación de programas génicos del desarrollo y neuromusculares, lo que respalda su relevancia para estudiar redes transcripcionales asociadas a enfermedad sin implicar resultados clínicos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Asc-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Trip4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Trip4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Trip4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Asc-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Trip4 para la investigación de la señalización de Asc-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Trip4 críticos para la función de Asc-1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Trip4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Asc-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Asc-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Trip4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Asc-1 (m) y el plásmido HDR Asc-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Trip4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Trip4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.