ART1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419208-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ART1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ART1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ART1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Art1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ART1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419208-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ART1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419208-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino Art1 codifica a ecto-ADP-ribosiltransferase 1 (ART1), uma enzima ancorada por glicosilfosfatidilinositol (GPI) que transfere ADP-ribose do NAD+ extracelular para proteínas-alvo na superfície celular. Essa mono-ADP-ribosilação pode modular a função de receptores, as interações célula–célula e eventos de sinalização a jusante ligados à regulação imune e ao remodelamento tecidual. A atividade de ART1 se cruza com o metabolismo extracelular de NAD+ e com redes de sinalização inflamatória que influenciam a ativação de leucócitos e as respostas da barreira epitelial. Alterações na ADP-ribosilação mediada por ART1 têm sido estudadas em contextos de fenótipos inflamatórios e autoimunes, bem como na sinalização do microambiente associada ao câncer, o que a torna relevante para investigações mecanísticas.
ART1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Art1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Art1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Art1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Art1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.