Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
ARID1B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433726
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ARID1B El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ARID1B, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ARID1B Anticuerpo (KMN1): sc-32762
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ARID1B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-433726 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Arid1b codifica ARID1B, una subunidad del complejo de remodelación de cromatina SWI/SNF (BAF) dependiente de ATP que contiene un dominio de interacción rico en AT y que regula el posicionamiento de los nucleosomas y la accesibilidad de los potenciadores (enhancers). Mediante el control del estado de la cromatina, ARID1B influye en programas transcripcionales que gobiernan la especificación del destino celular, la proliferación y la diferenciación, con funciones destacadas en el desarrollo neural y la expresión génica restringida a determinados linajes. ARID1B participa en la regulación epigenética que se integra con vías como Wnt/β-catenina, Notch y el control del ciclo celular, moldeando salidas transcripcionales dependientes del contexto. La alteración de la función de ARID1B se ha vinculado a trastornos del desarrollo y a fenotipos del neurodesarrollo, y la composición alterada de SWI/SNF se estudia con frecuencia en modelos relevantes de enfermedad relacionados con la desregulación transcripcional.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ARID1B (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Arid1b en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Arid1b junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Arid1b tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ARID1B.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Arid1b para la investigación de la señalización de ARID1B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Arid1b críticos para la función de ARID1B
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Arid1b para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ARID1B CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ARID1B CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Arid1b. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ARID1B (m) y el plásmido HDR ARID1B (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Arid1b para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Arid1b definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.