ARHGAP4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407621-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARHGAP4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ARHGAP4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ARHGAP4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ARHGAP4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ARHGAP4 Anticorpo (G-6): sc-376251
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARHGAP4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407621-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARHGAP4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407621-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARHGAP4 codifica uma proteína ativadora de GTPase (GAP) da família Rho que acelera a hidrólise de GTP em GTPases da família Rho, moldando a dinâmica do citoesqueleto de actina, a formação de protrusões de membrana e a polaridade celular. Por meio da modulação da sinalização de RhoA/Rac1/Cdc42, ARHGAP4 influencia a sinalização dependente de adesão, o crescimento de neuritos e a migração direcional em contextos hematopoéticos e neurais. A sinalização desregulada de GTPases Rho está amplamente implicada em alterações da motilidade celular, da função de células imunes e de fenótipos invasivos, tornando ARHGAP4 um nó útil para estudos mecanísticos de remodelação do citoesqueleto. Assim, a perturbação de ARHGAP4 é relevante para investigar vias que acoplam a organização da actina a saídas de sinalização e a programas transcricionais em estados celulares associados a doenças.
ARHGAP4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ARHGAP4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ARHGAP4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ARHGAP4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ARHGAP4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.