ARF4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419189
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ARF4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ARF4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ARF4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419189 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Arf4 codifica o fator de ADP-ribosilação 4 (ARF4), uma pequena GTPase da família ARF que regula o tráfego de membranas e a remodelação de lipídios no Golgi e no sistema endossomal. O ARF4 alterna entre estados ligados a GDP e a GTP para coordenar o brotamento de vesículas, a triagem de cargas e o transporte de receptores, incluindo vias que controlam o tráfego secretor e o direcionamento para cílios. Por meio de interações com maquinarias de revestimento/adaptação e com o metabolismo de fosfoinositídeos, o ARF4 ajuda a manter a organização das organelas e a entrega polarizada de membrana. A desregulação do tráfego dependente de ARF4 tem sido implicada em alterações na sinalização de receptores, defeitos de ciliogênese e respostas de estresse celular relevantes para a neurobiologia, a homeostase epitelial e fenótipos associados a tumores.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ARF4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Arf4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Arf4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Arf4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ARF4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Arf4 para a investigação da sinalização de ARF4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Arf4 críticos para a função ARF4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Arf4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ARF4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ARF4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Arf4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ARF4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ARF4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Arf4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Arf4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.