apoB CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-433607

개요

생쥐 Apob 유전자는 아포지단백질 B(apoB)를 암호화한다. apoB는 카일로미크론과 VLDL을 포함한 중성지방-풍부 지단백의 조립 및 분비, 그리고 이후 LDL 형성에 필수적인 구조적 아포지단백질이다. apoB는 소포체에서 미소체 중성지방 전달 단백질(microsomal triglyceride transfer protein)과의 상호작용을 통해 지단백 생합성을 조율하며, 간과 장의 지질 처리 과정을 전신 콜레스테롤 수송과 연결한다. 입자의 수와 조성을 조절함으로써 apoB는 지단백 수용체 결합, 지질 흡수, 그리고 이후의 대사 신호전달에 영향을 미친다. APOB 의존성 경로의 조절 이상은 생쥐에서 고지혈증, 지방간 표현형, 그리고 동맥경화와 관련된 지질 수송을 모델링하는 데 널리 활용된다.

apoB CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Apob 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Apob 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Apob의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 apoB 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 apoB 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Apob 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• apoB 기능에 중요한 Apob 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Apob 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• apoB CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 apoB CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Apob 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  apoB HDR 플라스미드 (m) 및 apoB HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Apob 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Apob 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.