apoA-II 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-404987-NIC

APOA2는 아폴리포단백질 A-II(apoA-II)를 암호화하며, apoA-II는 고밀도 지단백(HDL)의 주요 구조적 구성 요소로서 혈중에서 지단백 입자의 안정성, 지질 결합, 그리고 리모델링을 조절합니다. apoA-II는 지질 전달 및 지질분해 인자들과의 상호작용에 영향을 줌으로써 콜레스테롤과 중성지방 처리 과정의 핵심 단계에 관여하며, 그 결과 역콜레스테롤 수송과 더 넓은 지질 대사 경로를 형성합니다. APOA2의 발현량 또는 서열 변이는 혈장 지질 프로파일의 변화 및 심대사 형질 위험과 연관되어 왔으며, 이는 이상지질혈증과 대사 항상성 연구에서 APOA2를 기전적 핵심 노드로 활용할 근거를 뒷받침합니다. apoA-II를 표적으로 하는 시험관 및 생체 내 모델은 HDL 조성, 지질 플럭스, 그리고 동맥경화 생물학과 연결된 하위 염증 또는 산화 과정에 대한 분석을 가능하게 합니다.

apoA-II 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 APOA2 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 APOA2 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 APOA2의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, APOA2 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.