Plasmide CRISPR/Cas9 KO ANP (h): sc-400723
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ANP Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ANP, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ANP Antibody (F-2): sc-515701
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ANP (h) | sc-400723 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
NPPA code le peptide natriurétique atrial (ANP), une hormone d’origine cardiaque qui régule le volume sanguin et le tonus vasculaire via les récepteurs des peptides natriurétiques et la signalisation en aval cGMP/PKG. L’ANP favorise la natriurèse, la diurèse et la vasodilatation, et module l’activité de l’axe rénine–angiotensine–aldostérone, reliant la détection de l’étirement myocardique à l’homéostasie systémique hydro-électrolytique. L’expression de NPPA est étroitement contrôlée dans les cardiomyocytes et est induite de manière dynamique lors du remodelage lié au stress cardiaque. Une dérégulation de la signalisation NPPA/ANP est associée à la physiopathologie cardiovasculaire, notamment l’hypertension, l’hypertrophie cardiaque et l’insuffisance cardiaque, ce qui en fait un nœud clé pour les études mécanistiques de la régulation cardiométabolique et hémodynamique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ANP (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène NPPA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du NPPA, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert NPPA à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ANP.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en NPPA pour l'étude de la signalisation de ANP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de NPPA essentiels à la fonction de ANP
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de NPPA pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ANP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le ANP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus NPPA. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ANP plasmide HDR (h) et le ANP (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie NPPA pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles NPPA définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.