Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Annexin V Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419117
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Annexin V O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Annexin V, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Annexin V Anticorpo (H-3): sc-74438
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Annexin V Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419117 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene murino **Anxa5** codifica a anexina V, uma proteína de ligação a fosfolipídios dependente de Ca²⁺ que se associa ao folheto interno das membranas celulares e é rapidamente recrutada para locais de remodelamento de membrana. A anexina V contribui para o reparo de membranas, o tráfego vesicular e a regulação da dinâmica do citoesqueleto, sendo amplamente utilizada como marcador molecular da exposição de fosfatidilserina durante a apoptose. Por meio de suas interações com fosfolipídios aniônicos, a anexina V influencia processos ligados à sinalização de cálcio e pode modular eventos de membrana relevantes para inflamação e coagulação. Alterações na expressão ou na localização de **ANXA5** têm sido associadas a respostas desreguladas de morte celular e a contextos de lesão tecidual, sustentando seu estudo em modelos de ativação imune, biologia cardiovascular e estresse de células cancerosas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Annexin V (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Anxa5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Anxa5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Anxa5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Annexin V.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Anxa5 para a investigação da sinalização de Annexin V, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Anxa5 críticos para a função Annexin V
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Anxa5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Annexin V Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Annexin V Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Anxa5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Annexin V Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Annexin V (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Anxa5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Anxa5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.