Ankyrin-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419108

개요

Ank1는 막 어댑터 단백질인 앵커린-1(ankyrin-1)을 암호화하며, 막관통 단백질을 아래쪽의 스펙트린–액틴 세포골격에 연결해 세포의 기계적 안정성과 막 도메인 조직화를 지지한다. 마우스 적혈계 세포에서 앵커린-1은 적혈구 막 골격의 핵심 구성요소로서 band 3, 스펙트린 및 관련 복합체들 간의 상호작용을 조율하여 막의 변형성(deformability)과 이온 항상성에 영향을 준다. Ank1의 기능이 교란되면 세포골격 고정이 흐트러지고 적혈구 형태가 변할 수 있어, 용혈성 빈혈 유사 표현형과 더 넓게는 막–세포골격 결합 원리를 연구하기에 다루기 쉬운 모델을 제공한다. 앵커린-1의 기능은 원형질막에서의 단백질 수송과 구획화된 신호전달을 연구하는 데에도 관련이 있다.

Ankyrin-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ank1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ank1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ank1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Ankyrin-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Ankyrin-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ank1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Ankyrin-1 기능에 중요한 Ank1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ank1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Ankyrin-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Ankyrin-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ank1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Ankyrin-1 HDR 플라스미드 (m) 및 Ankyrin-1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ank1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ank1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.