ALPPL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-401492-KO-2

Visão geral

ALPPL2 codifica a fosfatase alcalina, semelhante à placentária 2, uma ectoenzima ancorada por glicosilfosfatidilinositol (GPI) que hidrolisa monoésteres de fosfato na superfície celular. Ao regular a desfosforilação de substratos extracelulares, a ALPPL2 pode influenciar a disponibilidade local de fosfato, a sinalização em microdomínios de membrana e programas associados à diferenciação, particularmente em contextos epiteliais e relacionados a células germinativas. Sua expressão é frequentemente usada como marcador de estados específicos do desenvolvimento, e alterações na expressão de ALPPL2 foram relatadas em diversos conjuntos de dados relacionados ao câncer. Essas características tornam a ALPPL2 relevante para estudos de identidade celular, biologia de enzimas de superfície e remodelamento de vias durante a transformação.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ALPPL2 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ALPPL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ALPPL2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ALPPL2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ALPPL2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ALPPL2 para a investigação da sinalização de ALPPL2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ALPPL2 críticos para a função ALPPL2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ALPPL2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ALPPL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ALPPL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ALPPL2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ALPPL2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ALPPL2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ALPPL2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ALPPL2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.