alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401939

Visão geral

ATP1A2 codifica a subunidade catalítica α2 da Na⁺/K⁺-ATPase, uma ATPase do tipo P localizada na membrana plasmática que mantém os gradientes intracelulares de Na⁺ e K⁺ ao acoplar a hidrólise de ATP ao transporte de íons. Esse gradiente eletroquímico sustenta o potencial de membrana, o equilíbrio osmótico, o transporte ativo secundário e a homeostase de Ca²⁺ por meio do trocador Na⁺/Ca²⁺, influenciando assim a excitabilidade e a sinalização em tecidos eletricamente ativos. A atividade de ATP1A2 se cruza com vias que regulam o tamponamento iônico neuronal e glial, a transmissão sináptica e as respostas celulares ao estresse decorrente de desequilíbrios iônicos. Alterações genéticas e funcionais em ATP1A2 estão associadas a fenótipos neurológicos, incluindo enxaqueca hemiplégica familiar e quadros relacionados de crises/ataxia, tornando-o um alvo relevante para estudos mecanísticos de distúrbios da excitabilidade.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ATP1A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ATP1A2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ATP1A2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ATP1A2 para a investigação da sinalização de alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ATP1A2 críticos para a função alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ATP1A2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ATP1A2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR alpha 2 Sodium Potassium ATPase/ATP1A2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ATP1A2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ATP1A2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.