
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Aldolase CCRISPR激活质粒(h) | sc-400988-ACT | 20 µg | $397.00 |
ALDOC 编码糖酵解酶——果糖二磷酸醛缩酶 C(aldolase C),其催化果糖-1,6-二磷酸可逆裂解为甘油醛-3-磷酸和二羟基丙酮磷酸,从而将葡萄糖代谢与 ATP 生成及生物合成通量联系起来。在人体组织中,ALDOC 与神经元和星形胶质细胞的代谢程序密切相关,并有助于将糖酵解与细胞氧化还原平衡及应激反应相耦联。在神经退行性变、缺血性损伤以及肿瘤代谢等情境下均有 ALDOC 表达改变的报道,支持其作为代谢重编程中的标志物与机制节点。作为碳水化合物代谢的核心成分,醛缩酶 C 为研究糖酵解调控、能量稳态以及与线粒体通路的代谢串扰提供了切入点。
Aldolase C CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ALDOC的表达。
Aldolase C CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的ALDOC基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于ALDOC转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Aldolase C表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的ALDOC位点,并能够研究内源性位点上依赖于Aldolase C的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ALDOC表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Aldolase C通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。