Aldolase A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419082

개요

Aldoa는 해당과정(glycolysis) 효소인 알돌레이스 A를 암호화하며, 과당-1,6-이인산(fructose-1,6-bisphosphate)을 글리세르알데하이드-3-인산(glyceraldehyde-3-phosphate)과 디하이드록시아세톤 인산(dihydroxyacetone phosphate)으로 가역적으로 절단하는 반응을 촉매합니다. 이를 통해 포도당 이용을 ATP 생성 및 생합성 전구체 생성과 연결합니다. 마우스 세포에서 알돌레이스 A는 해당과정을 통한 대사 플럭스를 뒷받침하고, 산화환원 균형과 세포 증식에 영향을 미치는 더 광범위한 탄소 대사 프로그램과 연계됩니다. 대사 기능 외에도, 알돌레이스 A는 액틴(actin) 역학과의 상호작용을 통해 세포골격 조직화에 관여하는 것으로 보고되어, 에너지 생산을 세포 형태 및 이동성과 연결합니다. ALDOA 발현 변화와 해당과정 재배선은 대사 스트레스 및 질환 관련 표현형 맥락에서 자주 연구되며, 종양 관련 대사 적응과 근육 관련 기능 저하 등을 포함합니다.

Aldolase A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Aldoa 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Aldoa 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Aldoa의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Aldolase A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Aldolase A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Aldoa 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Aldolase A 기능에 중요한 Aldoa 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Aldoa 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Aldolase A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Aldolase A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Aldoa 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Aldolase A HDR 플라스미드 (m) 및 Aldolase A HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Aldoa 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Aldoa 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.