Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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AGR2 Double Nickase Plasmid (m): sc-423838-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das AGR2 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- AGR2 Double-Nickase-Plasmid (m) und AGR2 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Agr2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: AGR2: sc-101211
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
AGR2 Double Nickase Plasmid (m) | sc-423838-NIC | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen *Agr2* kodiert anterior gradient 2 (AGR2), einen im endoplasmatischen Retikulum (ER) lokalisierten, protein-Disulfid-Isomerase-ähnlichen Faktor, der die oxidative Proteinfaltung und die Homöostase des sekretorischen Weges unterstützt. AGR2 trägt zu ER-Proteostase-Programmen bei, darunter zur Signalgebung der unfolded protein response (UPR) und zur Qualitätskontrolle von Client-Proteinen, die für die Sekretion oder die Lokalisierung in Membranen bestimmt sind. Über diese Funktionen beeinflusst AGR2 die epitheliale Differenzierung, die Muzinverarbeitung sowie die Dynamik von Zell-Zell-Interaktionen in Geweben mit hoher sekretorischer Belastung. Eine fehlregulierte AGR2-Expression wurde in Modellen epithelialer Dysfunktion und der Tumorbiologie mit Stressadaptation und veränderter Signalübertragung in Verbindung gebracht, wodurch *Agr2* einen nützlichen Ansatzpunkt zur Untersuchung von ER-Stress, Proteostase und der Regulation sekretorischer Netzwerke darstellt.
AGR2 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Agr2-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Agr2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Agr2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Agr2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.