Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) AGR2: sc-423838-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) AGR2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide AGR2 Double Nickase (m) et le plasmide AGR2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Agr2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: AGR2 Antibody (6C5): sc-101211
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) AGR2 | sc-423838-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Agr2** code l’« anterior gradient 2 » (AGR2), un facteur apparenté aux isomérases de ponts disulfure, résidant dans le réticulum endoplasmique (RE), qui soutient le repliement oxydatif des protéines et l’homéostasie de la voie sécrétoire. AGR2 contribue aux programmes de protéostasie du RE, notamment la signalisation de la réponse aux protéines mal repliées (UPR) et le contrôle qualité des protéines clientes destinées à la sécrétion ou à une localisation membranaire. Par ces fonctions, AGR2 influence la différenciation épithéliale, la maturation des mucines et la dynamique des interactions cellule–cellule dans les tissus à forte demande sécrétoire. Une expression dérégulée d’AGR2 a été associée à l’adaptation au stress et à une signalisation altérée dans des modèles de dysfonction épithéliale et de biologie tumorale, faisant d’**Agr2** un nœud pertinent pour explorer le stress du RE, la protéostasie et la régulation des réseaux sécrétoires.
AGR2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Agr2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Agr2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Agr2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Agr2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.