AFG3L2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404565-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AFG3L2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AFG3L2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AFG3L2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AFG3L2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AFG3L2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404565-NIC | 20 µg | $410.00 |
AFG3L2 codifica uma metaloprotease AAA+ da membrana interna mitocondrial que forma o complexo protease m-AAA, sustentando o controlo de qualidade de proteínas dependente de ATP no lado da membrana interna voltado para o espaço intermembranar. Ao regular a degradação e a maturação de componentes da cadeia respiratória e de substratos relacionados com o ribossoma mitocondrial, a AFG3L2 contribui para a eficiência da fosforilação oxidativa, para a proteostase mitocondrial e para a sinalização adaptativa ao stress. A perda ou disfunção de AFG3L2 perturba a dinâmica mitocondrial e a bioenergética, promovendo a acumulação de proteínas mal dobradas e comprometendo a homeostase da organela. Variantes em AFG3L2 estão associadas a fenótipos neurodegenerativos, ligando a atividade de protease mitocondrial à vulnerabilidade neuronal e à manutenção axonal.
AFG3L2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AFG3L2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AFG3L2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AFG3L2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AFG3L2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.