Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406817

Visão geral

ADCY9 codifica a adenilato ciclase 9 (AC9), uma enzima associada à membrana que converte ATP em AMP cíclico (cAMP), fornecendo uma entrada central de segundo mensageiro para a sinalização mediada por GPCR. A dinâmica de cAMP dependente de AC9 regula redes de fosforilação mediadas por PKA e EPAC, que moldam programas transcricionais, a atividade de canais iônicos e respostas específicas de tipos celulares, como a regulação metabólica e a sinalização inflamatória. Como parte da família das adenilil ciclases, a AC9 contribui para microdomínios compartimentalizados de cAMP que influenciam a dessensibilização de receptores e o controle por feedback de cascatas de sinalização. A desregulação das vias de cAMP está implicada em mecanismos de doenças cardiometabólicas, neurobiológicas e relacionadas ao sistema imune, tornando ADCY9 um alvo útil para mapeamento de vias e estudos de genótipo–fenótipo.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ADCY9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ADCY9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ADCY9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ADCY9 para a investigação da sinalização de Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ADCY9 críticos para a função Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ADCY9 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ADCY9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ADCY9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ADCY9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.