adenosine deaminase CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402201

개요

인간 ADA 유전자는 아데노신 디아미나아제(adenosine deaminase)를 암호화하며, 이는 세포질에 존재하는 효소로서 아데노신과 데옥시아데노신을 탈아미노화하여 이노신 유도체로 전환함으로써 퓨린 항상성을 유지하고 세포 내 데옥시아데노신 뉴클레오타이드 풀을 조절합니다. 면역조절성 아데노신과 잠재적으로 세포독성이 있을 수 있는 데옥시아데노신 대사산물의 농도를 제어함으로써, ADA는 림프구의 발달, 증식, 그리고 세포 스트레스 및 대사 조절과 연결된 신호 네트워크에 영향을 미칩니다. ADA 활성은 퓨린 구제(salvage) 및 분해 경로와 교차하며, 면역 및 비면역 조직에서 뉴클레오타이드 균형, DNA 합성 능력, 그리고 아데노신 수용체 매개 신호전달을 형성합니다. ADA의 유전적 기능 장애는 중증 면역결핍 표현형과 연관되어 있으며, 퓨린성 대사, 면역세포 생존성, 및 대사산물에 의해 유도되는 유전자 발현 조절을 연구하는 데 널리 활용되어 왔습니다.

adenosine deaminase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ADA 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ADA 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ADA의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 adenosine deaminase 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 adenosine deaminase 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ADA 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• adenosine deaminase 기능에 중요한 ADA 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ADA 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• adenosine deaminase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 adenosine deaminase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ADA 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  adenosine deaminase HDR 플라스미드 (h) 및 adenosine deaminase HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ADA 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ADA 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.