Adenosine A2B-R Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419015-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Adenosine A2B-RO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Adenosine A2B-R (m) e o Plasmídeo Double Nickase Adenosine A2B-R (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Adora2b. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Adenosine A2B-R Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419015-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adenosine A2B-R Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419015-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Adora2b codifica o recetor de adenosina A2B do rato (Adenosine A2B-R), um recetor acoplado à proteína G que deteta a adenosina extracelular gerada durante stress metabólico e inflamação. O A2B-R acopla-se principalmente às vias de sinalização Gs e Gq para regular as vias cAMP/PKA e PLC–Ca²⁺, moldando cascatas de quinases e programas transcricionais a jusante que influenciam a função de barreira, a produção de citocinas e o tónus vascular. Nos compartimentos imunitário e estromal, a sinalização do A2B-R modula o tráfego de leucócitos, a ativação mieloide e as respostas dos fibroblastos, integrando sinais purinérgicos com redes associadas à hipóxia e à inflamação. A atividade desregulada de ADORA2B tem sido implicada em processos inflamatórios e fibróticos, na remodelação tecidular associada à isquemia e na sinalização do microambiente tumoral, tornando-a relevante para estudos mecanísticos da regulação purinérgica em modelos de doença.
Adenosine A2B-R O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Adora2b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Adora2b. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Adora2b. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Adora2b interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.