Adducin α CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401693

개요

ADD1은 액틴 필라멘트의 끝을 캡핑하고 세포 피질(cortex)에서 스펙트린–액틴 네트워크의 조립을 촉진하는 막 골격 단백질인 어듀신 α(adducin α)를 암호화합니다. 어듀신 α는 세포골격 리모델링의 조절을 통해 세포 형태, 부착, 막 안정성에 영향을 미치며, 그 결과 세포 이동과 기계신호전달(mechanotransduction)과 같은 과정에도 영향을 줍니다. 어듀신의 기능은 인산화 의존적 신호전달에 의해 조절되는데, PKC 및 PKA 연관 경로를 포함하며 이들 경로는 액틴 결합 동역학과 피질 조직을 변화시킵니다. ADD1을 포함한 세포골격 및 막 스캐폴딩 단백질의 조절 이상은 상피 장벽 특성의 변화 및 심혈관·신경생물학 연구와 관련된 세포 표현형과 연관되어 왔습니다.

Adducin α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ADD1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ADD1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ADD1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Adducin α 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Adducin α 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ADD1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Adducin α 기능에 중요한 ADD1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ADD1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Adducin α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Adducin α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ADD1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Adducin α HDR 플라스미드 (h) 및 Adducin α HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ADD1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ADD1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.